免疫学诊断最常使用的方法有凝集试验（平板或试管凝集试验），红细胞凝集试验及红细胞凝集抑制试验、环状沉淀试验、琼脂扩散沉淀试验、补体结合试验、中和试验（病毒血清中和试验、毒素抗毒素中和试验）、酶联免疫吸附试验（ELISA）以及免疫荧光试验等。这些方法虽然各不相同，但原理一样，都是利用抗原与抗体的特异反应。其中有一些是利用已知的抗体（血清）鉴定未知的抗原（细菌或病毒），另一些是利用已知的抗原（细菌或病毒）鉴定未知的抗体（血液或血清）。
（一）平板或试管凝集试验
这种检验方法通常是用已知的细菌菌体悬浮液去检查被测血清或血液中是否存在特异性抗体，当存在有特性抗体时，抗菌素原抗体互相作用，产生絮片状或颗粒状凝集。
平板凝集试验是在洁净的载碎片或塑料凝集板上滴1滴菌体悬浮液，再于其上滴加等量的被测血清或血液。然后用牙签或火柴捧将其搅和均匀。如为阳性，1~3分钟后即从液滴的边缘开始发生菌体凝集；如为阴性，则液滴保持均匀浑浊。
试管凝集试验的具体操作方法各有不同，但大都是将待检血清以生理盐水作倍比稀释（如1：10、1：20、1：40、1：80等，或1：25、1：50、1：100等），然后每管加入同样数量的已知抗原（菌体悬浮液），充分振摇混匀，置36度温箱或20度以上的室温朗透明；如为阴性，则试管内液体上下仍均匀浑浊。不同疾病由于抗原、抗体凝集程度不同，凝集价（即发生凝集的最高稀释倍数）也不同。因此，判断各种疾病阳性的标准凝集价是不一样的。用于试管凝集度验的待检血清必须新鲜、不溶血，没有明显的蛋白凝块，否则会影响结果的判定。
（二）红细胞凝集试验和红细胞凝集抑制试验
引起家禽传染病的某些病毒，例如A型禽流感病毒，由于具有血凝素，可以使鸡或其他一些动物红细胞发生效集，称为红细胞凝集现象。如果在这些病毒悬液中先加入待异性的免疫血清，则病毒凝集红细胞的作用被抑制，称为红细胞凝集抑制现象。
红细胞凝集试验常用于测定病毒的含量；红细胞凝集抑制试验也可用于病毒的鉴定、流行病学调查及免疫接种效果的监测。
试验用的红细胞一般采自年龄1年以上的健康公鸭，而且最好是3只以上。血液采集后应立即加入4倍以上事先灭菌的2%枸橼酸钠溶液中，迅速摇匀，以防凝固。这样采集的红细胞，如保存4度冰箱，使用时间不超过1周。如需保存更长时间使用，可把采集的血液加入于灭菌的Alsever氏液中（也应按时4倍以上的量），这样可保存1个月左右，但如发现红细胞变色、溶解、则应废弃，不宜再用。
试验用的病毒应为纯培养物，可用鸭胚培养，也可用细胞培养。每次试验用的病毒，应为同一批制作，而且最好是同一瓶，以免病毒浓度不同，影响凝集价。病毒应保存零下三十度以下，而且不应反复冻融。反复多次冻融可使病毒大量死亡，滴度下降。
进行红细胞凝集抑制试验时，病毒与抗体的感作时间不能太短，例如禽流感病毒，应不少于15分钟。如果在病毒悬液中加入血清后立即加红细胞，由于病毒和抗体未能很好中和，血凝抑制价低，不能代表真实的情况。
红细胞凝集试验和红细胞凝集抑制试验可用宏量法（在康氏管内进行），也可用微量法（在微量试验板上进行）。病毒或血清的稀释度，可用1：10、1：20、1：40、1：80、1：160等系列，也可用1：8、1：16、1：32、1：64、1：128、1：256等系列。
试验结果的判定，一般于充分振摇并经静置45分钟后进行，红细胞均匀凝集，于管底（或孔底）铺成一层，记为“三“红细胞均匀凝集铺于管底，但边缘不整齐，有向下垂滑的趋向，记为“二”；红细胞于管底形成一个环状，周围有小凝集块，记为“一”红细胞于管于管底形成一个小团，但边缘不光滑，有少量小凝集块，记为“+”；红细胞于管底形成一个小团，；边缘光滑，记为“-”。凝集价的判定是以红细胞凝集达“一”的最高稀释度为标准。
近年来，微量法红细胞凝集试验及红细胞凝集抑制试验正越来越广泛用于家禽传染病，尤其是鸡新城疫及禽流感的血清学诊断。微量法所用的试验板为有机玻璃制成，有72孔（12乘以6)和96孔(12乘以8)两种,孔的直径为6毫米,深度为9毫米.试验用的稀释棒棒头为不锈钢,如没有不锈钢稀释棒,可用600瓦电热丝自制,或者用16号针头,载去尖头,然后用橡皮管连接于吸管上,或直接套于玻璃注射器上使用,微量法试验每次移液量为0.025毫升,是由稀释棒或针头控制的,因此用前必须校对准确,使用时稀释棒不要浸入液面过深,针头则要保持垂直,否则影响液量的准确性.微量试验板及稀释棒或针针头,用后均应清洗干净,并于3%盐酸液中浸泡过夜,惟达到消毒的目的及清除污垢.
微量法的结果判定,一般以放置20度室温20分钟后观察为宜,时间太长,红细胞会下滑,不易分辨.
(三)琼脂扩散沉淀试验
病毒和待异性抗体都能在低浓度的琼脂凝固层中穿透扩散,两者于琼脂层中相遇还会产生沉淀,显著形成肉眼可见的沉淀线.据此原理而进行的血清学检验,称为琼脂扩散沉淀试验.
进行琼指扩散沉淀试验,可用已知的阳性血清检测未知的病毒,也可用已知的病毒去检测未知的血清.
试验用的琼脂,一般宜采用纯化琼脂或琼脂糖,浓度以1%为好(以0.01摩磷酸盐缓冲液,加0.14摩氯化钠的缓冲生理盐水或生理盐水配制).并加入适量的防腐剂(例如万分之一的硫柳汞、千分之一的石炭酸）。琼脂液不必高压灭菌，加热溶化后，冷即可倾注于培养皿或载玻片上，厚度以2~3毫米为宜。凝固后可置4~8度冰箱内备用，但应保持一定的湿润度。
开始试验前先在琼脂上打小圆孔，孔径大小可根据不同试验而定，一般为3~6毫米，两孔间的距离为2~5毫米，一般每组打7个孔，中央一孔放置已知的病毒或阳性血清作对照。为避免打孔后琼脂，或用酒精灯于玻板下微微加热，使琼脂稍受热熔化。
滴加试验样本后的琼脂板可放于37度的温箱内，但要注意保存一定的湿润度。结果判断，先观察已知阳性血清与已知病毒（即对照组）之间的沉淀线，然后再检查其样本是否有相同的沉淀线，如相同，则表示待检样本为阳性，如不出现沉淀线，或沉淀在联线处出现小的分支，则表示样本的抗原性与已知病毒不同。某些情况下，由于抗原或抗体的浓度低，不能出现明显的沉淀线。为了防止这种情况，试验应尽可能选择价高的阳性血清，必要时也可先将抗原进行浓缩处理。有时，为了增加沉淀线的可见度，也可将扩散沉淀完成后的琼脂板吸去剩余的试液后，用生理盐水浸泡洗去蛋白杂质，然后浸于用70%酒精配制的2%醋酸液中固定1小时，用氨基黑或偶氮胭脂红染色。
（四）病毒中和试验
特异性的免疫血清（中和抗体）可以与病毒发生中和作用，而使病毒对易感动物、鸭胚或人工培养的器官、细胞失去感染能力。根据这一原理，不但可以对被检病毒或血清定性，而且可以按其被中和的程度进行定量。
病毒中和试验，可以采用固定病毒量与不同稀释度的血清进行中和，也可采用固定血清量与不同稀释度的病毒进行中和。但无论采用哪一种方法中和，以观察是否尚有感染力，从而判定是否已被中和，并计算中和指数。
病毒中的试验，操作比较复杂，而且需要应用活的动物、鸭胚或细胞培养物等，判断结果所需时间也较长，相对来说，是较费时费钱的，因此在临床上比较少应用。
（五）免疫标记技术
1.免疫荧光技术 就是用免疫荧光方法检查抗体、抗原或免疫复合物的试验。
有些荧光素能和形成抗体的丙种球蛋白分子相结合，并保持抗体活性不变，当这种荧光抗体与相应的抗原接触时，便形成具有一定荧光的免疫复合物，借助荧光显微镜便可发现存在于组织压印片或冰冻的切片中的病毒粒子。这种利用事先制备的荧光抗体对相应的病毒粒子进行染色，以便研究和鉴定病毒的技术，称为荧光抗体试验。
荧光抗体试验在病毒学上有广泛的用途，例如用于病毒感染的快速诊断，研究病毒粒子在细胞内产生和发展的位置，同一组细胞感染两面三刀种以上的病毒的检出、亚临床型或隐性感染的检出等。
免疫荥光技术主要有直接法和间接法两种。直接法即单层免疫荧光技术；间接法包括双层抗体技术、夹层技术、荧光抗补体抗体技术等。
由于此类试验所要求的设备技术条件较高，一般基层实验室不容易做到，这里不作详述。
2.放射免疫测定 这是一种借助于放射性强度的测定，检查测定标本中佩量抗原或抗体的方法。以定量的放射性同位素标记的抗原和待测一未标记抗原与对应抗体作用，使这身份种抗原与抗体竞争性结合。通过测定抗原体复合物（B）和游离抗原（F）的放射性强度，即可得出B/F值。B/F大，即表示样品中待测抗原含量低，B/F值小，即表示样品中待测抗原含量高。将测定的B/F值与标准曲线（已知不同浓度未标记抗原与B/F值相互关系的曲线）相比较，即可查出样品中抗原的含量。反之，亦可用标记抗体来测定抗原。
3.酶联免疫吸附法 这是一种用酶标记的抗原或抗体的微量测定法。如将抗原固定在支持物（如96孔反应板）上，加入等检血清，洗涤除去多余的血清，然后加入酶（例如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶）标记的抗Ig抗体使与等检血清中已与对应抗原结合的特异性抗体相结合，洗涤后，再加入可被酶水解的底物。最后，用分光光度计测底物水解后的吸收值，后者与标准曲线比较后，即可计算出抗体的量。
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